- 更新時(shí)間2016-08-10
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UV紫外光度計(jì)分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸 收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。物質(zhì)的吸收光譜本質(zhì)上就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量, 相應(yīng)地發(fā)生了分子振動(dòng)能級(jí)躍遷和電子能級(jí)躍遷的結(jié)果。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子 、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會(huì)相同,因此,UV紫外光度計(jì)每種物質(zhì)就有其 *的、固定的吸收光譜曲線,可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或 測(cè) 定該物質(zhì)的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)。因?yàn)椴煌墓庾V帶寬對(duì)同一種藥品進(jìn)行分析測(cè)試, 有不同的誤差, 所以,不同行業(yè)、應(yīng)對(duì)光譜帶寬有不同的要求。因此, 使用者應(yīng)根據(jù)分析工作的誤差要求來選取不同的光譜帶寬。特別是制藥行業(yè)、科研工作或要求較高的使用者, 更應(yīng)如此。
UV紫外光度計(jì)利用紫外光譜可以推導(dǎo)有機(jī)化合物的分子骨架中是否含有共軛結(jié)構(gòu)體系, C=C 如 -C=C、C=C-C=O、苯環(huán)等。利用紫外光譜鑒定有機(jī)化合物遠(yuǎn)不如利用紅外光譜有 效,因?yàn)?strong>UV紫外光度計(jì)很多化合物在紫外沒有吸收或者只有微弱的吸收,并且紫外光譜一般比較簡(jiǎn) 單,特征性不強(qiáng)。利用紫外光譜可以用來檢驗(yàn)一些具有大的共軛體系或發(fā)色官能團(tuán)的 化合物,可以作為其他鑒定方法的補(bǔ)充。
UV紫外光度計(jì)在正式使用一臺(tái)新的儀器以前, 一般都先對(duì)儀器的線性進(jìn)行測(cè)試。但大多數(shù)使用者只是在某一試樣的某一濃度附近, 用濃度的倍數(shù)變化, 測(cè)出這一段的線性。這只能反映儀器在小范圍內(nèi)的實(shí)用情況, 并不能說明儀器的線性是否符合出廠指標(biāo), 也不能反映儀器的線性范圍。為了全面了解UV紫外光度計(jì)的線性, 還需按下述方法進(jìn)行測(cè)試。
UV紫外光度計(jì)不同的試樣要求用不同的光譜帶寬來分析, 應(yīng)該選擇*或靠近*的光譜帶寬來分析, 才能得到*分析結(jié)果。光譜帶寬不能過大或過小。選擇光譜帶寬度方法是, 在一定實(shí)驗(yàn)條件下測(cè)試吸光度隨光譜帶寬度變化, 以獲得zui大吸光度值的光譜帶寬作為欲選擇的光譜帶寬。UV紫外光度計(jì)前面談到的測(cè)試同一濃度的青霉素鈉、青霉素鉀的例子, 0. 3nm 光譜帶寬是*光譜帶寬, 比0. 3nm 大和小的光譜帶寬, 測(cè)試的吸光度值都比0. 3nm 光譜帶寬的小。